Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型冠心病患者进展缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次显现浮现肾脏自身突变到显现浮现1标准型肝炎病理腹泻的令人满意率在儿童末期就有更好的叙述，多个肾脏自身突变感染性的儿童之前有70%在血清转换后10月内复发肝炎，而随访15年的儿童这一平均值减少到84%。远比，九成病理1标准型肝炎一半以上的标准型1标准型肝炎的肺癌机制还很难得到不应有的学术研究。

愈发多的人开始运用于分期子系统来定义1标准型肝炎的令人满意：性状在显现浮现多种肾脏自身突变时进入第1之前，显现浮现血糖异常时进入第2之前，显现浮现腹泻时进入第3之前。一些多发肾脏自身突变感染性的性状，在1期和2期，令人满意较太快，并发展为肺癌的1标准型肝炎。我们之前叙述了一组成员在首次探测到多种肾脏自身突变采样后大概10年无肝炎的极太快令人满意者，这组成员病症人数少，但特点极其指明。随后，我们发现肾脏自身蛋白质特异性CD8+T巨噬细胞反不应在令人满意缓太快的病症之前基本不存在，但在近期肺癌和长期存在的肝炎病症之前很易于探测到。这可能表明，与令人满意病症相对，这些病症自身免疫反不应的调节增强。

早期学术研究表明，尽管调节性T巨噬细胞(Treg)数量也就是说，但肝炎病症存在一些动态缺陷，其之前有数对IL-2的反不应并能减小。此外，肝炎病症之前的畸变CD4+T巨噬细胞可能对调节兼具抵抗性，展现为畸变T巨噬细胞的抑制增强，自然归因于的Treg和体外归因于的正向Treg，以及蛋白质经历的CD4+T巨噬细胞之前IL-2反不应增强。本学术研究的目的是叙述了CD4+调节性T巨噬细胞(Treg)在在在极缓太快令人满意者之前的特点，他们的平均年龄为43岁(31-72岁)，随访时间段为18-32年。

方式：BOX学术研究是一项以年轻人子系统化的纵向学术研究，在21岁不限肺炎的病症亲属之前检查1标准型肝炎的危险因素。我们之前叙述了长期缓太快令人满意者的特点，他们持续保持多重肾脏自身突变感染性最多10年，但很难显现浮现肝炎的病理腹泻，太快性或非来进行性自身免疫。随后，10名继续持续保持无肝炎并愿意给予大量血液采样的缓太快令人满意者纳入T和B巨噬细胞动态学术研究。在在此之前的学术研究之前，8名太快令人满意者(SP组成员)，之前位年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁之间的肾脏自身突变感染性。所有的与会者都处于1标准型肝炎令人满意的1期，尽管一些人随后耗尽了肾脏自身突变对某些蛋白质的感染性反不应，然而，一名病症已经处于2期大概6年，但很难显现浮现病理腹泻，一名病症被诊断为肝炎，该受试者72岁，在采集实验采样时，其HbA1c升高到53 mmol/mol(7%)，在数据学术研究之前对该ADP来进行了直接评估。除去外周血单个核巨噬细胞(PBMCs)，采用多表达出来式流式巨噬细胞绝技和T巨噬细胞抑制试验评估ADP之前Treg的阈值、基因标准型和动态。运用于FlowSOM和CITRUS(聚类确认、总括和复出)来进行无监督聚类学术研究，评估Treg基因标准型。

结果：与心理健康ADP相对，来自太快令人满意体的知觉CD4+T巨噬细胞的监督聚类标示出，激活的知觉CD4+ Treg阈值减少，与糖皮质激素正向的TNFR相关蛋白质(GITR)表达出来减少有关。一名HbA1c升高的病症与令人满意缓太快者和意味着的比对组成员相对，Treg谱有所多种不同。动态学术研究表明，与心理健康ADP相对，来自缓太快令人满意体的Treg细胞内的CD4+畸变T巨噬细胞抑制引人注意受损。展现为对畸变CD4+T巨噬细胞CD25和CD134表达出来的抑制减少。

左图1 深入的基因标准型学术研究标示出，CD4+Treg亚标准型在太快令人满意表头之前减少。由FlowSOM作用于的Treg室，聚集在来自所有ADP的活CD4+CD45RA -巨噬细胞上。根据标上物表达出来确认显现出10个元簇:知觉T巨噬细胞_1;知觉T cell_2;知觉T cell_3;知觉T cell_4;CD49b知觉T巨噬细胞;HLA-DR + GITR +知觉T巨噬细胞;寄存器Treg_1;寄存器Treg_2;寄存器Treg_3;和寄存器Treg_4。(a)运用于9个多种不同Treg标上作用于的10个元簇的MST。每个终端值得一提的是一个空降兵(100个空降兵)，更多的元空降兵(10个元空降兵)在终端组成员周围着色。每个终端之前的饼左图坚称单个标上的表达出来档次。(b)每个元聚类的热左图，以标示出整体标上表达出来。(c, d)为HD组成员(c)和SP组成员(d)作用于左图，以及FlowSOM识别系统的每个元簇的基岩。(e-l)远比总质量为每个metacluster箱子直通左图(总质量> 0.05%)确定为HD和SP组成员:寄存器Treg_2 (e),寄存器Treg_3 (f),寄存器Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +知觉T巨噬细胞(h)、知觉T cell_1(i),知觉T cell_2 (j),知觉T cell_3 (k) n d CD49b知觉T巨噬细胞(l)。黄色带长子值得一提的是捐助者SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon一对一符号秩检验。此键适用于左图形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

左图2 运用于CITRUS的预测模标准型表明，Treg阈值的减少是令人满意缓太快的标志。分级细胞内(a - f)和棉花学术研究(g-k)比较SP与会者和意味着的HD与会者在CD4+CD45RA−T巨噬细胞上的差异。(a)未成熟CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l社会阶层的值得一提的是性左图。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR表达出来来进行除去，模拟FlowSOM社会阶层。(b) HD(黑点)和SP(蓝点)组成员以及ADPSP 606(黄色)之前CD25+ cd127的阈值简介左图。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+细胞内集合的箱子直通左图;(c) HLA-DRloGITR−(寄存器Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(寄存器Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(寄存器Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+寄存器T cell)。(g - i)柑桔簇螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3表达出来强度着色，箭头突显现出的簇被识别系统为SP和HD表头之间的多种不同。(j)箱子直通左图标示出了在SP(蓝点)和HD(灰点)组成员之前，CITRUS知觉Treg_3和Treg_4的远比总质量(平均值)。(k)直方左图标示出每个簇的基因标准型(粉红色)和Treg标上远比表达出来与故事情节表达出来(深蓝色);上列，寄存器Treg_3;上头一行，寄存器Treg_4。故事情节与所有其他簇之前标上的表达出来有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon一对一符号秩检验

左图3 与心理健康献血者相对，令人满意缓太快者知觉treg的GITR减少。每个知觉CD4+T巨噬细胞元簇(知觉T巨噬细胞_1;知觉T cell_2;知觉T cell_3;CD49b +知觉T巨噬细胞;HLA-DR + GITR +知觉T巨噬细胞;寄存器Treg_2;寄存器Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)探测每个表达出来标上的变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)表头的表达出来热左图(sp606不有数在内)。(c,d)知觉Treg_4元簇之前所有HD(灰色)、所有SP(深蓝色)和SP 606(黄色)的FlowSOM GITR表达出来联结，标示出直方左图(c)和简介左图(d)。Wilcoxon一对一符号秩和检验，p< 0.07(黄色)所有ADP有数，p< 0.05(深蓝色)ADPSP 606和意味着的HD不有数在测试之前。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs之前GITR表达出来，从分级细胞内，从所有HD(灰色)、所有SP(深蓝色)和SP 606(黄色)联结，标示出直方左图(e)和简介左图(f) *p< 0.05, Wilcoxon一对一符号秩检验

左图4 来自缓太快令人满意的CD4+ treg巨噬细胞控制畸变CD4+T巨噬细胞的并能减小。SP组成员用深蓝色的直通和带长子坚称，HD组成员用灰色的直通和带长子坚称，黄色的直通/带长子坚称ADPsp606。运用于CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T巨噬细胞来进行分选。CD4+CD25−(不应答者)被标上为CFSE, Treg按推论的平均值指示剂。用抗CD3 /28微珠再造巨噬细胞，人才培养3天后来进行流式巨噬细胞绝技探测。(a-d)与CD4+不应答者远比不应的treg人才培养(自体)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD不应答者人才培养。(a,b,f) CFSE细胞分裂(a,e)和CFSE抑制平均值(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的抑制平均值。运用于感染性比对(激活的响不应巨噬细胞不含treg)计算抑制平均值。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差学术研究。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

左图5 畸变CD4+T巨噬细胞对缓太快令人满意的T巨噬细胞再造的抑制更敏感。SP组成员用深蓝色的直通和带长子坚称，HD组成员用灰色的直通和带长子坚称，黄色的直通/带长子坚称ADPsp606。运用于CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T巨噬细胞来进行分选。CD4+CD25−(不应答者)被cfsel标上，treg按推论的平均值指示剂。用抗CD3 /28微珠再造巨噬细胞，人才培养3天后来进行流式巨噬细胞绝技(CD25反染)和巨噬细胞因长子学术研究。HD Treg与HD、SP或sp606不应答者一同人才培养。(a,b) CFSE细胞分裂(a)和CFSE抑制次之(b)。(c,d) CD25抑制次之(c)和CD134抑制次之(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共人才培养之前的表达出来。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差学术研究。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

假设：我们得显现出的假设是，来自缓太快令人满意长子的再造知觉CD4+Treg在GITR表达出来之前得到了扩展和丰富多彩，凸显了大幅度学术研究Treg在1标准型肝炎几率性状之前的总括的必要性。

文中显现出处：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28