Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者困难重重缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次注意到肝细胞自身病原基底到注意到1HG高血压外科副作用的令人满意率在成人中后期就有很好的叙述，多个肝细胞自身病原基底乙HG肝炎的成人当中有70%在血液转换后10年底患上高血压，而随访15年的成人这一比例降低到84%。相比之下，九成外科1HG高血压一半以上的HG1HG高血压的发病机制还并未得不到应有的科学研究。

日渐多的人开始运用于分期系统来判别1HG高血压的令人满意：生物基底在注意到多种肝细胞自身病原基底时踏入第1下一阶段，注意到高血压诱发时踏入第2下一阶段，注意到副作用时踏入第3下一阶段。一些多发肝细胞自身病原基底乙HG肝炎的生物基底，在1期和2期，令人满意速度慢，并发展为发病的1HG高血压。我们以前叙述了一第一组在首次检测到多种肝细胞自身病原基底抽取后至较少10年无高血压的极慢令人满意者，这第一组病患者次数较少，但基本特征非常清楚。随后，我们发现肝细胞自身抗体特异性CD8+T肽质质三子化在令人满意很慢的病患者当中基本不存在，但在同类型发病和仍然存在的高血压病患者当中很难以检测到。这似乎指出，与令人满意病患者相比，这些病患者自身免疫质三子化的抑制增强。

早期科学研究指出，尽管抑制性T肽质(Treg)数量正常，但高血压病患者存在一些机能不足之处，其当中以外对IL-2的质三子化战斗能力降低。此外，高血压病患者当中的波动CD4+T肽质似乎对抑制非常具抵抗性，展现显现出为波动T肽质的依赖性西移动，自然造成的Treg和灌注造成的诱导Treg，以及抗体境况的CD4+T肽质当中IL-2质三子化西移动。本科学研究的目标是叙述了CD4+抑制性T肽质(Treg)在一小群极很慢令人满意者当中的基本特征，他们的平均成年人为43岁(31-72岁)，随访一段时间为18-32年。

方法有：BOX科学研究是一项以人群为了将的纵向科学研究，在21岁以下确诊的病患者亲属当中检测1HG高血压的致命因素。我们以前叙述了仍然很慢令人满意者的基本特征，他们保持稳定多重肝细胞自身病原基底乙HG肝炎超过10年，但并未注意到高血压的外科副作用，慢性或非开展性自身免疫。随后，10名继续保持稳定无高血压并主动包括大量血液抽取的很慢令人满意者纳入T和B肽质机能系统性。在现今的科学研究当中，8名慢令人满意者(SP第一组)，当中位成年人43岁(31-72岁)，18 - 32岁两者之间的肝细胞自身病原基底乙HG肝炎。所有的大多数人都东南面1HG高血压令人满意的1期，尽管一些人随后失去了肝细胞自身病原基底对某些抗体的乙HG肝炎质三子化，然而，一名病患者已经东南面2期至较少6年，但并未注意到外科副作用，一名病患者被病因为高血压，该人会72岁，在采集实验抽取时，其HbA1c升高到53 mmol/mol(7%)，在数据系统性当中对该供基底开展了原则上审核。分开外周血单个核肽质(PBMCs)，采行多参数流式肽质奥义和T肽质依赖性试验性审核供基底当中Treg的频谱、特异性和机能。运用于FlowSOM和CITRUS(聚类鉴定、表征和回归)开展无指导聚类系统性，审核Treg特异性。

结果：与有益供基底相比，来自慢令人满意基底的潜意识CD4+T肽质的指导聚类表明，激活的潜意识CD4+ Treg频谱降低，与免疫抑制诱导的TNFR相关肽(GITR)强调降低有关。一名HbA1c升高的病患者与令人满意很慢者和匹配的印证第一组相比，Treg谱有所多种不同。机能系统性指出，与有益供基底相比，来自很慢令人满意基底的Treg介导的CD4+波动T肽质依赖性明显毁损。展现显现出为对波动CD4+T肽质CD25和CD134强调的依赖性降低。

所示1 深入的特异性得出结论，CD4+Treg亚HG在慢令人满意队列当中降低。由FlowSOM降解的Treg室，周围在来自所有供基底的活CD4+CD45RA -肽质上。根据上标物强调鉴定显现出10个元簇:潜意识T肽质_1;潜意识T cell_2;潜意识T cell_3;潜意识T cell_4;CD49b潜意识T肽质;HLA-DR + GITR +潜意识T肽质;寄存器Treg_1;寄存器Treg_2;寄存器Treg_3;和寄存器Treg_4。(a)运用于9个多种不同Treg上标降解的10个元簇的MST。每个链表代表一个战略性(100个战略性)，非常大的元战略性(10个元战略性)在链表第一组周围上色。每个链表当中的粥所示对此单个上标的强调档次。(b)每个元聚类的热所示，以表明整基底上标强调。(c, d)为HD第一组(c)和SP第一组(d)降解所示，以及FlowSOM识别的每个元簇的覆盖层。(e-l)相较数量级为每个metacluster装点阵所示(数量级> 0.05%)确认为HD和SP第一组:寄存器Treg_2 (e),寄存器Treg_3 (f),寄存器Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +潜意识T肽质(h)、潜意识T cell_1(i),潜意识T cell_2 (j),潜意识T cell_3 (k) n d CD49b潜意识T肽质(l)。浅蓝色圆圈代表**SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩检验。此键适用于所示形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

所示2 运用于CITRUS的预测模HG证实，Treg频谱的降低是令人满意很慢的徽标。分级暂时性(a - f)和柑橘系统性(g-k)相当SP大多数人和匹配的HD大多数人在CD4+CD45RA−T肽质上的多种不同。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l社会群基底的代表性所示。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR强调开展分开，模拟FlowSOM社会群基底。(b) HD(白斑)和SP(白斑)第一组以及供基底SP 606(浅蓝色)当中CD25+ cd127的频谱概述所示。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+暂时性同构的装点阵所示;(c) HLA-DRloGITR−(寄存器Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(寄存器Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(寄存器Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+寄存器T cell)。(g - i)果树簇螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3强调强度着色，斜线突显现出的簇被识别为SP和HD队列两者之间的多种不同。(j)装点阵所示表明了在SP(白斑)和HD(灰点)第一组当中，CITRUS潜意识Treg_3和Treg_4的相较数量级(比例)。(k)直方所示表明每个簇的特异性(粉红色)和Treg上标相较强调与背景强调(深蓝色);上列，寄存器Treg_3;下面一路上，寄存器Treg_4。背景与所有其他簇当中上标的强调有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩检验

所示3 与有益献血者相比，令人满意很慢者潜意识treg的GITR降低。每个潜意识CD4+T肽质元簇(潜意识T肽质_1;潜意识T cell_2;潜意识T cell_3;CD49b +潜意识T肽质;HLA-DR + GITR +潜意识T肽质;寄存器Treg_2;寄存器Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)检测每个强调上标的转变。(a,b)来自HD (a)和S (b)队列的强调热所示(sp606不以外在内)。(c,d)潜意识Treg_4元簇当中所有HD(灰色)、所有SP(深蓝色)和SP 606(浅蓝色)的FlowSOM GITR强调串联，表明直方所示(c)和概述所示(d)。Wilcoxon配对符号秩和检验，p< 0.07(浅蓝色)所有供基底以外，p< 0.05(深蓝色)供基底SP 606和匹配的HD不以外在测试当中。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs当中GITR强调，从分级暂时性，从所有HD(灰色)、所有SP(深蓝色)和SP 606(浅蓝色)串联，表明直方所示(e)和概述所示(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对符号秩检验

所示4 来自很慢令人满意的CD4+ treg肽质支配波动CD4+T肽质的战斗能力降低。SP第一组用深蓝色的支线和圆圈对此，HD第一组用黑色的支线和圆圈对此，浅蓝色的支线/圆圈对此供基底sp606。运用于CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T肽质开展分选。CD4+CD25−(这样的话者)被上标为CFSE, Treg按推论的比例校准。用抗CD3 /28微珠再生肽质，养成3天后开展流式肽质奥义检测。(a-d)与CD4+这样的话者相较应的treg养成(自基底)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD这样的话者养成。(a,b,f) CFSE增生(a,e)和CFSE依赖性一般而言(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的依赖性一般而言。运用于乙HG肝炎印证(激活的响应肽质不含treg)计算依赖性一般而言。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差系统性。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重相当测试

所示5 波动CD4+T肽质对很慢令人满意的T肽质再生的依赖性非常恰当。SP第一组用深蓝色的支线和圆圈对此，HD第一组用黑色的支线和圆圈对此，浅蓝色的支线/圆圈对此供基底sp606。运用于CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T肽质开展分选。CD4+CD25−(这样的话者)被cfsel上标，treg按推论的比例校准。用抗CD3 /28微珠再生肽质，养成3天后开展流式肽质奥义(CD25反染)和肽质因三子系统性。HD Treg与HD、SP或sp606这样的话者共同养成。(a,b) CFSE增生(a)和CFSE依赖性调升(b)。(c,d) CD25依赖性调升(c)和CD134依赖性调升(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共养成当中的强调。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差系统性。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重相当测试

事实：我们计算显现出来的事实是，来自很慢令人满意三子的再生潜意识CD4+Treg在GITR强调当中得不到了扩展和珍贵，强调了更进一步科学研究Treg在1HG高血压后果生物基底当中的异质性的必要性。

原文显现出处：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28